Análisis de una muestra de Psilometoxina

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En 2021 se fundó la Iglesia de la Psilometoxina, una organización que afirma haber desarrollado un nuevo compuesto no fiscalizado. Según sus fundadores, añadiendo 5-MeO-DMT al sustrato en crecimiento de Psilocybe cubensis, el hongo lo transforma en psilometoxina. Pero, ¿se trata realmente de un nuevo compuesto?
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Desde que se fundó la Iglesia de la Psilometoxina y se dio a conocer el desarrollo de un supuesto nuevo compuesto no fiscalizado se han realizado diversos análisis de muestras procedentes de esta organización, generando una gran polémica al respecto [1, 2]. Los análisis realizados por diversas organizaciones y con distintos métodos descartan que su nuevo sacramento se trate de psilometoxina, sino que concuerdan en señalar a psilocina y psilocibina como principales compuestos de su producto sagrado [2, 3].

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En su defensa, la Iglesia argumenta que:

• Los métodos GC-MS no son capaces de analizar directamente fármacos que no sean volátiles (no se vaporizan fácilmente), polares (solubles en agua) o térmicamente lábiles (destruidos por el calor).
• Creemos que la psilometoxina no es volátil, polar y térmicamente lábil y, por lo tanto, es un mal candidato para realizar pruebas mediante este proceso.
• Nuestra iglesia realiza bioensayos personalmente en cada lote de nuestro sacramento para determinar su eficacia y seguridad.

Además, otros miembros ponen en duda los resultados de los análisis practicados argumentando la falta de estándar de referencia y la supuesta necesidad de sintetizar psilometoxina en el laboratorio para obtener dicho patrón.

Con tal de aportar datos y arrojar luz al caso, en este artículo vamos a explicar los métodos y técnicas utilizadas para analizar una muestra sellada de esta organización que nos envió de forma anónima uno de sus miembros. Al mismo tiempo, intentaremos dar respuesta a los cuestionamientos planteados por la Iglesia.

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Análisis de la muestra

Todos los alcaloides comúnmente conocidos de Psilocybe sp., como Psilocina, Psilocibina, Baeocistina, Norbaeocistina, etc., pueden ser aislados de la biomasa fúngica seca con Metanol [4, 5]. 5-MeO-DMT también es fácilmente soluble en metanol [6]. Por lo tanto, podemos suponer con seguridad que Psilometoxina es bastante soluble en Metanol, que utilizamos como solvente de extracción no dirigido para la muestra que recibimos. La muestra parece ser biomasa fúngica molida y seca. Tiene el característico olor a hongo y un aspecto grisáceo.

Para identificar de manera inequívoca la posible Psilometoxina sin un estándar de referencia, utilizamos un enfoque de espectrometría de masas dirigido (MRM - monitoreo de reacción múltiple). Aquí hay una breve descripción de la técnica y explicación de por qué la Psilometoxina puede ser detectada incluso sin un estándar de referencia si realmente está presente en la muestra:

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• Espectrometría de Masas Dirigida: La espectrometría de masas (MS) es una técnica utilizada para identificar y cuantificar la cantidad de moléculas específicas en una muestra. En la espectrometría de masas dirigida, el instrumento está configurado para detectar solo moléculas específicas de interés, en lugar de escanear todas las moléculas presentes en una muestra. Esto hace que el proceso sea más rápido y preciso para esas moléculas específicas.
• MRM (Monitoreo de Reacción Múltiple): MRM es un modo de espectrometría de masas dirigida. Dentro del MRM, el espectrómetro de masas está configurado para detectar una "molécula madre" particular y posteriormente monitorear su fragmentación en "moléculas hija" designadas. Monitorear tanto las moléculas madre como hija asegura un alto nivel de confianza en la detección de la molécula de interés.

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¿Por qué se puede usar para identificar analitos a través de LCMS sin estándares de referencia? ‍

• Especificidad: MRM es altamente específico. Al monitorear la transición de una molécula madre a una molécula hija, hay un sistema de verificación doble en su lugar. Es como tener un sistema de autenticación de dos factores; la posibilidad de que una molécula aleatoria tenga ambas masas, madre e hija, es extremadamente baja. 
• Sensibilidad: Como el espectrómetro de masas está observando exclusivamente transiciones específicas, muestra una sensibilidad aumentada a esas moléculas particulares, incluso si están presentes en cantidades minúsculas. 
• Fragmentación Predecible: En ausencia de un estándar de referencia, es factible anticipar cómo ciertas moléculas se fragmentarán según su estructura inherente y las condiciones dentro del espectrómetro de masas. Esto facilita la predicción de los iones hija a monitorear. 
• Integración LCMS: Cuando se combina con cromatografía líquida (LC), el momento en que una molécula sale (eluye) del cromatógrafo (su tiempo de retención) proporciona otra capa de identificación. Las moléculas distintas muestran diferentes tiempos de retención; por lo tanto, si una molécula muestra las transiciones MRM anticipadas y eluye en el tiempo esperado, hay un alto grado de confianza en su identificación.

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Los detalles de las transiciones que hemos elegido se pueden encontrar en nuestro informe analítico a continuación.
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Resultados

Solo se pudo detectar Psilocina y Psilocibina en la muestra. No se observaron picos para el ion madre de Psilometoxina o las transiciones MRM en su tiempo de retención predicho. [3] Además, se encontraron trazas de Baeocistina (datos no mostrados).

Por otro lado, según la Iglesia, la 5-MeO-DMT se suministra a Psilocybe sp. que, a continuación, introduce biosintéticamente un grupo hidroxi en la posición cuatro del andamiaje indólico produciendo Psilometoxina (4-OH-5-MeO-DMT). Si el precursor 5-MeO-DMT se suministra al hongo, tiene que ser absorbido por las células y, como mínimo deberían detectarse trazas dentro de la biomasa [7]. Cabe destacar que también analizamos la muestra para detectar la presencia de 5-MeO-DMT, cuyo resultado también fue negativo.

A continuación nuestro informe analítico completo:

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Conclusión

En los últimos años la Iglesia de Psilometoxina, ahora llamada de la Síntesis Sagrada, afirma haber desarrollado un sacramento exclusivo que contiene psilometoxina, un compuesto no fiscalizado.

Una afirmación que ha generado escepticismo y controversia en la comunidad científica y psicodélica. A pesar de las defensas y argumentos presentados por la Iglesia, los resultados obtenidos por nuestro laboratorio, en consonancia con los obtenidos por otros laboratorios independientes, cuestionan la existencia real de la psilometoxina en los sacramentos de la Iglesia, y en su lugar, han identificado la presencia de psilocina y psilocibina. 

Por último, tampoco encontramos ningún rastro de 5-MeO-DMT en la muestra, lo que es una prueba más de que la supuesta producción biosintética de psilometoxina no es cierta.

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Referencias

1. Nickels, D. (2023). Church of Psilomethoxin, Part 1: Sacramental Skepticism. Is the Church in Denial? Psymposia. Link 
2. Nickles, D. (2023). The Church of Psilomethoxin Part 2: Unraveling the Sacred Chemistry. Psymposia. Link 
3. Williamson S, Sherwood A. Fungi Fiction: Analytical Investigation into the Church Of Psilomethoxin's Alleged Novel Compound Using UPLC-HRMS. ChemRxiv. Cambridge: Cambridge Open Engage; 2023; This content is a preprint and has not been peer-reviewed. 
4. Patent US3183172A - Obtaining psilocybin and psilocin from fungal material (US 3183172 A); Owner: Albert Hofmann; Filed: 02/16/1959 
5. Casale, John. (1985). An Aqueous-Organic Extraction Method for the Isolation and Identification of Psilocin from Hallucinogenic Mushrooms. Journal of forensic sciences. 30. 247-50. 10.1520/JFS10989J. 
6. K. Trout, Some Simple Tryptamines, 2nd ed. Trout’s Notes & Mydriatic Productions, 2012
7. Mario de la Fuente (2023). Opinions | The Church of Psilomethoxin: Fantasy Chemistry Gets Fact Checked. Psychedelic Alpha. Link

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